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NIBSC93/722白介素10試劑盒的使用方法

發(fā)布時(shí)間: 2022-05-12  點(diǎn)擊次數(shù): 1193次
  NIBSC93/722白介素10是由160個(gè)氨基酸組成4個(gè)α螺旋結(jié)構(gòu)的的細(xì)胞因子,分子量為18.5 kDa。在水溶液中以二聚體形式存在,分子量約為39 kDa。是個(gè)多效性的因子,能夠?qū)Χ喾N細(xì)胞起作用,主要表現(xiàn)為免疫抑制和免疫刺激兩方面的作用,特別是在調(diào)節(jié)淋巴系和髓系的細(xì)胞功能方面扮演重要的作用。IL-10 也具有單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞依賴、抗原刺激引起的的PBMNC 和 NK 細(xì)胞合成其它細(xì)胞因子的抑制作用。巨噬細(xì)胞膜介導(dǎo)的共刺激引起的T細(xì)胞和NK細(xì)胞活化后的產(chǎn)物及功能也可被IL-10所抑制。
 
  IL-10是單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞功能的強(qiáng)有力的調(diào)節(jié)物。IL-10作為細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)的抑制物,能夠抑制像前列腺素E2、TNF-α、IL-1、IL-10和 IL-8等許多引起炎癥的細(xì)胞因子。IL-10 能夠促進(jìn)可溶性TNF受體的釋放和ICAM-1和B7在細(xì)胞表面的表達(dá)。IL-10還參與B細(xì)胞、柱狀細(xì)胞及胸腺細(xì)胞的增殖和分化的調(diào)控。
 
  NIBSC93/722白介素10劑盒采用雙抗體夾心ELISA法檢測樣本中IL-10 的濃度。IL-10 捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)本或參考品時(shí),其中的IL-10 會與捕獲抗體結(jié)合,其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。當(dāng)加入生物素化的抗人IL-10 抗體后,抗人IL-10 抗體與IL-10 接合,形成夾心的免疫復(fù)合物,其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親合素。
 
  生物素與親合素特異性結(jié)合,親合素連接的酶就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來;其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。加入顯色劑,若樣本中存在IL-10 將會形成免疫復(fù)合物,辣根過氧化物酶會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入中止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測,讀其450nm處的OD值,IL-10 濃度與OD450值之間呈正比,通過參考品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對照未知樣本中OD值,即可算出標(biāo)本中IL-10 濃度。
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